全部 标题 作者
关键词 摘要

OALib Journal期刊
ISSN: 2333-9721
费用:99美元

查看量下载量

相关文章

更多...

三重实时荧光PCR相对定量法快速诊断21和X染色体数目异常

, PP. 1479-1481

Keywords: 荧光定量PCR,拷贝数,染色体数目异常

Full-Text   Cite this paper   Add to My Lib

Abstract:

目的建立三重TaqMan实时荧光定量PCR体系,快速诊断21、X染色体数目异常。方法选取21号染色体唐氏综合征特异区域(DSCR3)和X染色体1113KDNA序列范围分别作为21号和X染色体目的基因,同时选择12号染色体上磷酸甘油醛脱氢酶基因(GAPDH)为参比基因,分别设计引物和TaqMan探针,经PCR反应体系优化,采用单管三重及2-ΔΔCt相对定量数据分析,根据基因拷贝数变化诊断21号和X染色体数目异常,并进行方法学应用评价。结果通过优化,模板量在5~30ng/μl时3个基因都可以得到有效扩增,目的基因和参照基因扩增效率基本一致,均接近100%。采用上述体系检测24例正常标本和20例异常标本(包括血液和羊水标本),正常标本的21号2-ΔΔCt值均为2,而唐氏综合征患者均为3;正常男性的X染色体2-ΔΔCt值均为1,而正常女性均为2。其临床标本检测结果的敏感性、特异性均达100%。结论建立的三重TaqMan实时荧光PCR相对定量法快速诊断21和X染色体数目异常方法,稳定性、可靠性和实用性均较好。

References

[1]  刘彦慧,吴亚敏,黎丽芬,等. 三重实时荧光PCR相对定量法快速诊断21和X染色体数目异常[J].第三军医大学学报,2010,32(13):1479-1481.
[2]  冯文曦,梅玲,王宁,等.荧光定量PCR技术检测尖锐湿疣患者人乳头瘤病毒感染的结果分析[J].第三军医大学学报,2005,27(13):1366. [2]蹇骞,徐海伟,谢汉平,等.RCS大鼠自然病程中视网膜边缘生发区细胞增殖及Shh/Ptc信号途径改变的观察[J].第三军医大学学报,2009,31(11):997.  JIAN Qian,XU Hai-wei,XIE Han-ping,et al.Shh/Ptc pathway and retinal stem cells in proliferating marginal region of RCS rats during development of retinitis pigmentosa[J].J Third Mil Med Univ,2009,31(13):997. [3]戴纪刚,肖颖彬,闵家新,等.肺癌组织中线粒体转录因子A的表达与线粒体DNA拷贝数变化的关系[J].第三军医大学学报,2010,32(17):1891. [4]王秋泉,黄平,胡守旺,等.建立禽流感H7和H9亚型荧光定量PCR检测方法[J].第三军医大学学报,2010,32(03):246.  Wang Qiuquan,Huang Ping,Hu Shouwang,et al.Establishment of fluorescence quantitative PCR method for detection of avian influenza virus subtypes H7 and H9[J].J Third Mil Med Univ,2010,32(13):246. [5]邓晓斌,王珊,邹琳,等.小儿恶性肿瘤化疗前后外周血多药耐药基因、多药耐药相关蛋白基因、肺耐药蛋白基因的变化及临床意义[J].第三军医大学学报,2010,32(10):1087.  Deng Xiaobin,Wang Shan,Zou Lin,et al.Expressions and significance of MDR1, MRP1 and LRP in peripheral blood of chemotherapy children with malignant solid tumors[J].J Third Mil Med Univ,2010,32(13):1087. [6]谭文婷,罗霄,晏泽辉,等.基于ERC-PCR的环境内分泌干扰物检测体系研究[J].第三军医大学学报,2010,32(01):1.  Tan Wenting,Luo Xiao,Yan Zehui,et al.ERC-PCR based detection for environmental endocrine-disrupting compounds[J].J Third Mil Med Univ,2010,32(13):1. [7]戴纪刚,肖颖彬,闵家新,等.肺癌线粒体DNA拷贝数改变和微卫星不稳定性[J].第三军医大学学报,2010,32(19):2134. [8]罗勇军,刘福玉,陈丽,等.高原习服适应中白细胞线粒体DNA拷贝数的变化规律[J].第三军医大学学报,2011,33(04):359. [9]李雪涛,陈芳琳,王欣欣,等.95D细胞转移相关基因在原发灶、循环肿瘤细胞和转移灶中的差异表达[J].第三军医大学学报,2011,33(10):980.  Li Xuetao,Chen Fanglin,Wang Xinxin,et al.Differential expression of metastasis-associated genes in primary tumor, circulating tumor cells, and metastasis of human giant-cell lung cancer cell line 95D[J].J Third Mil Med Univ,2011,33(13):980. [10]苗杰,黄庆,常青,等.母体血浆游离DNA分子浓度和片段完整性分析[J].第三军医大学学报,2012,34(08):768.  Miao Jie,Huang Qing,Chang Qing,et al.Level and different segments of free DNA molecules in maternal plasma[J].J Third Mil Med Univ,2012,34(13):768.

Full-Text

Contact Us

service@oalib.com

QQ:3279437679

WhatsApp +8615387084133