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ISSN: 2333-9721
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肺炎链球菌毒力蛋白DNA疫苗优势抗原组合筛选及鉴定

, PP. 922-925

Keywords: 肺炎链球菌,肺炎链球菌表面黏附素A,肺炎链球菌表面蛋白A,肺炎链球菌溶菌酶,基因疫苗

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Abstract:

目的探讨肺炎链球菌DNA疫苗候选抗原联合免疫的优势抗原组合方式。方法分子克隆肺炎链球菌表面蛋白A(PspA)N端及肺炎链球菌溶血素（Ply）基因序列，构建重组质粒pcDNA3.1-PspA’和pcDNA3.1-PBD（PBD为Ply点突变减毒体），免疫印迹（Westernblot）检测重组质粒在哺乳动物BHK-21细胞中的表达（包括前期工作中构建的重组质粒pcDNA3.1-PsaA）。将3种重组基因疫苗以不同方式组合肌肉注射免疫150只BALB/c小鼠（B组：pcDNA3.1-PsaA+pcDNA3.1-PspA’,C组：pcDNA3.1-PsaA+pcDNA3.1-PBD,D组：pcDNA3.1-PspA’+pcDNA3.1-PBD，E组：pcDNA3.1-PsaA+pcDNA3.1-PspA’+pcDNA3.1-PBD），检测各组小鼠血清特异性抗体IgG水平，观察免疫小鼠鼻咽部肺炎链球菌D39携带改变和D39腹腔攻击小鼠21d生存情况。结果成功构建3种重组真核表达载体，ELISA检测结果显示B组小鼠血清特异性IgG抗体水平与E组相似（P>0.05），均明显高于A、C、D组[A组：对照空质粒组pcDNA3.1(+)]小鼠（P<0.01）；免疫小鼠鼻咽部D39携带菌落计数提示B组小鼠相似于E组小鼠（P>0.05），并明显少于C、D组和阴性对照组（A组和PBS组，P<0.01），并且D39腹腔攻击小鼠21d生存时间分析亦提示其中位生存时间明显长于C组及阴性对照组（A组和PBS组，P<0.01）。结论PspA’联合PsaA的抗原组合方式具有高效的协同保护效能，可作为肺炎链球菌DNA疫苗的优势候选抗原组合。

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