激光捕获显微切割-单细胞PCR技术的应用研究

目的建立一套优化的激光捕获显微切割-单细胞聚合酶链反应（Polymerasechainreaction，PCR）技术，应用于分子组织学研究中单细胞基因的检测。方法从淋巴结反应性增生冷冻组织切片中，应用激光捕获显微切割获取1～10个淋巴细胞，采用优化的单细胞PCR反应体系和条件进行β-珠蛋白基因检测。结果单轮常规PCR各组多细胞的扩增阳性率比较无显著性差异（P>0.05），而单细胞的扩增阳性率低于各组多细胞，有显著性差异（P<0.01）；半巢式降落式PCR的单细胞扩增阳性率高于单轮常规PCR，有显著性差异（P<0.01）。结论联合应用优化的激光捕获显微切割及半巢式降落式PCR技术,显著提高了单细胞PCR的敏感性、特异性和稳定性。