CD147对体外破骨细胞分化过程中基质金属蛋白酶-2、基质金属蛋白酶-9分泌的影响

目的建立体外破骨细胞（osteoclasts，OCs）诱导分化模型，研究CD147对体外破骨细胞分化过程中基质金属蛋白酶-2（matrixmetalloproteinases2，MMP-2）和基质金属蛋白酶-9（matrixmetalloproteinases9，MMP-9）合成与分泌的影响。方法采用健康成人外周血分离单个核细胞贴壁培养，应用巨噬细胞集落刺激因子（macrophagecolonystimulatingfactor，M-CSF）与NF-κB受体活化因子配体(receptororactivatorofNF-κBligand，RANKL）诱导单个核细胞向Ocs分化。实验分为对照组（RANKL+M-CSF）与蛋白诱导组（RANKL+M-CSF+CD147蛋白）。应用抗酒石酸酸性磷酸酶染色（tartrate-resistantacidphosphatase，TRAP）及骨吸收实验检测鉴定OCs的分化成熟，Real-timePCR技术检测CD147、MMP-2和MMP-9mRNA在破骨前体细胞（osteoclastprecursorcells，OPCs）中表达变化，酶联免疫吸附实验（ELISA）检测细胞上清液中MMP-2、MMP-9的表达。结果①TRAP染色和骨吸收实验检测到破骨样细胞形成并具有骨吸收功能,建立体外Ocs诱导分化模型成功。②在24、48h蛋白诱导组CD147mRNA[(1.344±0.207)、(1.816±0.222)]、MMP-2mRNA[(1.187±0.077)、(1.437±0.231)]及MMP-9mRNA[(1.128±0.107)、(2.353±0.679)]的相对表达量均高于相应的对照组（P<0.05），且MMP-2、MMP-9mRNA的相对表达量与CD147mRNA的表达量呈正相关（r分别为0.818、0.758，P<0.01）。③24、48h蛋白诱导组MMP-2蛋白[（386.71±40.66）、（367.35±20.72）μg/L]、MMP-9蛋白[（1177.78±66.42）、（1514.37±68.56）μg/L]表达均高于相应对照组（P<0.05），蛋白诱导组MMP-2蛋白的表达在24h与48h间无统计学差异（t=1.190，P>0.05），而MMP-9蛋白的表达在48h显著高于24h（t=7.589，P<0.05）。结论外源性CD147蛋白可以促进OCs分化成熟过程中MMP-2及MMP-9的合成与分泌，但MMP-2分泌的增加不呈时间依赖性。