小鼠骨髓浆细胞样树突状细胞亚群的体外诱导及其鉴定

目的建立小鼠骨髓浆细胞样树突状细胞亚群的体外培养方法，并从形态、表型特征及功能方面与髓样树突状细胞亚群进行对比研究，探讨浆细胞样树突状细胞的生物学特性。方法无菌条件下提取C57BL/6小鼠骨髓细胞，体外通过特异性细胞因子Flt3-Ligand诱导其向浆细胞样及髓样树突状细胞亚群分化，并利用倒置显微镜、流式细胞仪及混合淋巴细胞反应从形态学、表型特征及功能三方面对培养得到的浆细胞样树突状细胞进行鉴定。结果小鼠骨髓细胞经Flt3-Ligand体外诱导培养8d，可获得表型为CD11c+CD11b-B220+的浆细胞样树突状细胞亚群。形态上，浆细胞样树突状细胞亚群多为表面光滑的圆形，胞核常呈偏心分布的肾形。共刺激分子表达上，未成熟浆细胞样树突状细胞低水平表达CD80、CD86、CD40及MHC-Ⅱ类分子，不能被TLR4激动剂LPS诱导成熟，但在TLR9激动剂CpGODN1826作用下，能够迅速转化为成熟树突状细胞。功能方面，浆细胞样树突状细胞具有一定的刺激同种异基因淋巴细胞增殖的能力，但弱于同等刺激条件下的髓样树突状细胞。结论小鼠骨髓细胞在Flt3-Ligand的体外刺激诱导下，可向浆细胞样树突状细胞方向分化，所培养出的浆细胞样树突状细胞形态上多呈淋巴细胞样，低表达共刺激分子，并具有一定的刺激同种异基因淋巴细胞增殖的能力。