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大豆科学 2011
大豆GmERF6基因的原核表达及重组蛋白纯化DOI: 10.11861/j.issn.1000-9841.2011.06.0906, PP. 906-909 Keywords: 大豆,GmERF,载体构建,原核表达,纯化 Abstract: 将大豆中已克隆的一个新的ERF转录因子基因(GmERF6)构建到原核表达载体pET28上,导入大肠杆菌Rosetta(DE3)中,对其进行IPTG诱导。结果表明:在IPTG浓度为0.3mol?L-1,诱导时间为3h时,重组蛋白得到表达,分子量大约为30kDa。SDS-PAGE电泳结果表明重组蛋白主要以包涵体形式存在。用8mol?L-1尿素对其进行溶解后经Ni柱纯化,得到较好的纯化效果,Bradford法测定其蛋白浓度为0.56mg?mL-1。
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