大豆叶片蛋白质双向电泳技术的改良

以大豆叶片为材料，比较分析了3种蛋白质的提取方法，讨论了等电聚焦时间和染色方法等关键因素对双向电泳的影响，同时选择不同的IPG胶条，设定了第1向等电聚焦和第2向SDS-PAGE电泳的电泳程序及参数。结果表明：采用TCA-丙酮沉淀法提取蛋白质，选择pH4~7（17cm）IPG胶条，适当延长和改变等电聚焦的第2步和第3步的时间和参数，并且用考马斯亮蓝和银染复合染色法对12%的凝胶进行染色，能够获得清晰蛋白点的双向电泳图谱，说明优化出的双向电泳技术更加适合于大豆叶片总蛋白质分离。