农杆菌介导的大豆子叶节遗传转化技术流程及操作要点

大豆遗传转化效率低，是大豆转基因育种亟待解决的重要问题。以大豆子叶节为外植体采用农杆菌介导法，系统地研究了大豆子叶节遗传转化各技术环节的操作要点，包括工程菌液制备、无菌苗获得及外植体制备、农杆菌的侵染及共培养、不定芽诱导、不定芽伸长、根诱导、驯化与移栽、抗性植株的获得及转基因植株的检测等，建立了一套较稳定、高效的大豆子叶节遗传转化体系。并利用该体系，将野生大豆耐盐碱相关基因A1对大豆品种绥农28、合丰50、合丰55、东农50进行遗传转化，系统地探讨了大豆基因型、影响T-DNA的转移效率的各环节、筛选剂浓度及不同基因型转化效率等几个重要因素。