HBV多表位复合基因在NS-1细胞的表达

？目的研究HBc颗粒为呈现载体的HBV多表位复合基因在哺乳动物细胞NS-1内的表达.方法PCR扩增HBc1～72aa及93～183aa编码序列并合成HBV多表位复合基因,定向克隆至pcDNA3.1(+).经双酶切及核苷酸序列测定等方法筛选阳性克隆.阳性质粒以Lipofectamine介导转染NS-1细胞,通过ELISA及间接免疫荧光等方法检测细胞表达产物.结果双酶切及测序结果证实阳性质粒正确克隆了约890bp的HBc与HBV多表位复合基因的杂合基因.重组子成功转染NS-1细胞并表达HBc-Mep融合蛋白.结论HBc颗粒为呈现载体的HBV多表位复合基因在哺乳动物细胞NS-1内正确表达目的蛋白.为研究pHBc-Mep作为DNA疫苗的免疫活性奠定基础.为后期检测核酸疫苗pHBcMep的细胞免疫效果提供靶细胞.