组蛋白H3高乙酰化对心脏相关转录因子Islet-1的调控作用

目的：探讨组蛋白H3乙酰化修饰对心脏发育早期相关转录因子胰岛素基因增强结合蛋白1（Insulingeneenhancerprotein1，Islet-1）的调控作用。方法：体外培养心肌祖细胞，分别用不同浓度组蛋白去乙酰化酶抑制剂辛二酰苯胺异羟肟酸（Suberoylanilidehydroxamicacid，SAHA）干预（0、0.5、1.0、2.0、4.0μmol/L），噻唑蓝（Methylthiazoyltetrazolium，MTT）比色实验检测SAHA对细胞增殖的影响，筛选出SAHA的合适干预浓度，用Westernblot技术检测心肌祖细胞组蛋白H3乙酰化状态，Real-timePCR检测Islet-1的mRNA表达水平变化，染色质免疫共沉淀（Chromatinimmunoprecipitation，ChIP）Real-timePCR技术检测Islet-1启动子区组蛋白H3的乙酰化水平。结果：SAHA0.5、1.0μmol/L处理组较对照组细胞增殖率有所提高，但差异没有统计学意义（P>0.05），SAHA2.0μmol/L处理组与对照组细胞增殖率相当（P>0.05）。SAHA4.0μmol/L处理组与对照组比较，细胞增殖受到抑制（P<0.05）。SAHA2.0μmol/L处理48h后心肌祖细胞H3乙酰化水平与对照组比升高7.23倍（P<0.05）。Islet-1的mRNA表达与对照组比提高了4.68倍（P<0.05），Islet-1启动子区组蛋白H3乙酰化水平是对照组的2.08倍（P<0.05）。结论：在心肌祖细胞中，组蛋白H3高乙酰化水平促进Islet-1表达，Islet-1受到组蛋白H3乙酰化调控。