人α1微球蛋白质的克隆、表达、纯化及生物学活性鉴定

目的：构建人α1微球蛋白质（α1-microglobulin,α1M）基因的原核表达质粒，在大肠杆菌中表达α1M蛋白质，纯化并初步鉴定其生物学活性。方法：PCR扩增α1M基因序列，然后转化入大肠杆菌B834中进行表达，利用镍离子亲和层析、离子交换层析及分子筛纯化，ABTS法鉴定其生物学活性。结果：正确构建了α1M的表达质粒，α1M在大肠杆菌B834中为可溶性上清表达，纯化获得了纯度高达95%的α1M蛋白质，分子筛结果显示其在溶液中呈现单体和二聚体2种聚集状态，ABTS法结果显示了重组获得的α1M具有抗氧化活性。结论：α1M能在大肠杆菌B834菌中大量上清表达，且易于纯化，初步鉴定具有抗氧化活性，为下一步进行α1M蛋白质的晶体结构解析和相关功能研究奠定了基础。