人参三七川芎提取物延缓内皮细胞复制性衰老的机制研究

目的：探讨人参三七川芎提取物对内皮细胞复制性衰老(humanumbilicalveinendothelialcells,HUVECs)的影响。方法：体外培养的HUVEC-2C传代至第8代，造成内皮细胞复制性衰老模型。细胞分为4组，8代衰老模型组、维生素E(VitE)组(50mg·L-1)、中药高、低(50，20mg·L-1)剂量组,采用衰老相关β-半乳糖苷酶(SA-β-gal)染色法观察细胞衰老改变，流式细胞仪分析细胞周期，激光共聚焦显微镜观察细胞内活性氧(ROS)含量，硝酸还原酶法检测培养液一氧化氮(NO)和抗超氧阴离子水平,Western-blot法检测各组细胞AngⅡ1型和2型受体(AT1R和AT2R)，NAD(P)H氧化酶p47phox的蛋白表达。结果：8代衰老模型组β-gal染色阳性细胞数明显增多，细胞停滞在G0/G1期，激光共聚焦显微镜下ROS荧光强度明显增强，培养液中抗超氧阴离子、NO含量减少，p47phox，AT1R，AT2R蛋白表达上调。给予高、低剂量中药处理后，可明显改善细胞的衰老状态，β-gal染色阳性细胞数减少，G0/G1期细胞减少，G2/M期细胞增加，ROS荧光强度减弱，抗超氧阴离子、NO含量较8代衰老模型组增加，p47phox，AT1R，AT2R蛋白表达下调，差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论：人参三七川芎提取物能够延缓内皮细胞复制性衰老,通过活性氧途径下调NADPH氧化酶p47phox的表达，最终使ROS产生减少；同时，中药提取物还能降低衰老内皮细胞AT1R，AT2R的表达，改善内皮功能，这可能是益气活血中药延缓内皮细胞衰老的主要原因之一。