马铃薯c-8,7甾醇异构酶基因(stsi1)cdna克隆及表达

以拟南芥c-8,7甾醇异构酶的氨基酸序列为信息探针搜索genbank数据库,对高度同源的马铃薯est序列进行拼接、引物设计和rt2pcr扩增,扩增产物测序结果证实获得一个马铃薯c-8,7甾醇异构酶基因(stsi1)的全长cdna序列。序列分析结果显示,stsi1全长886bp,包含59bp的5′非编码序列、161bp的3′非编码序列和一个长度为666bp编码221个氨基酸的开放阅读框,分子量约为25kd。氨基酸结构分析显示该蛋白的n端含有一个长度由35个氨基酸残基组成的信号肽,c端成熟肽区域含有典型的类ebp结合域。氨基酸比对分析表明,stsi1与已知c-8,7甾醇异构酶同源性介于32.9%～61.3%之间,与拟南芥atsi1相似性最(61.3%)。rt-pcr表达谱分析显示,stsi1在马铃薯的块茎芽眼和表皮组织中均能表达,并且该基因的表达水平受贮藏温度升高和光照增强的正向调节。