芹菜与cms胡萝卜原生质体非对称性融合的初步研究

以芹菜和胡萝卜瓣化型细胞质不育系为试材,研究了碘乙酰胺(ioa)和紫外线对两种原生质体的钝化作用,以及融合温度、聚乙二醇6000(peg6000)和ca2+浓度对融合效果的影响,并对融合再生植株进行了鉴定。结果表明,6mmol·l-1ioa处理7min以上可钝化芹菜原生质体细胞质,强度约为20μmol·m-2·s-1的紫外线持续辐射9min可使胡萝卜原生质体活力趋于0;适当低温(5℃)可提高聚合率约20%;peg6000浓度为40%,高ph液中ca2+浓度为0.1mmol·l-1时最适宜两种原生质体融合;融合产物液体浅层培养40d后产生的可见细胞团在不添加植物生长调节剂的ms0培养基上再生出了完整植株。用aflp分子标记对12株再生株总dna的鉴定结果表明,再生株多不同程度地发生了芹菜和胡萝卜基因的非对称性融合。用sts分子标记鉴定再生株的细胞质基因,瓣化型雄性不育特异引物sts4的扩增结果显示,除1号单株外其余11株均成功转入了胡萝卜瓣化型雄性不育基因。