扁桃acsfb基因的克隆与原核表达分析

利用rt-pcr和race技术,从新疆栽培扁桃‘鹰嘴’花药中获得了一个全长的sfb(s-hap-lotype-specificf-boxgene)基因(genbank登录号为fj362525),命名为acsfbd。该基因全长1125bp,编码374个氨基酸,在n末端含有一个大约50个氨基酸组成的f2box基序,含有两个高变区(hva和hvb)和两个可变区(v1和v2)。生物信息学的方法成功预测了acsfbd蛋白分子质量为43kd,为亲水性、非分泌型蛋白,在基质内起连接酶(ec6.-.-.-)的作用。成功构建了原核表达载体,并转化大肠杆菌bl21(de3),sds2page检测结果显示表达了一个约60kd的蛋白。