根癌农杆菌介导北海道黄杨遗传转化体系的建立

在建立北海道黄杨(euonymusjaponicus'cuzhi')再生体系的基础上，建立其遗传转化体系，以获得转雪花莲外源凝集素(galanthusnivalisagglutinin，gna)基因植株。采用根癌农杆菌(agrrobacteriumtumefaciens)　(lba4404菌株)介导法，研究影响北海道黄杨遗传转化的若干因素。结果表明，预培养与否、菌液浓度、侵染时间、共培养时间等对转化频率都有一定的影响。在遗传转化过程中，不经预培养，根癌农杆菌浓度od600=0.6，侵染下胚轴40min，再共培养3d，有利于获得最高遗传转化效率。抗性植株经pcr和dna-southernblot检测表明，目的基因已整合到北海道黄杨基因组中。