辣椒高赖氨酸蛋白基因cflr全长cdna的克隆及其组织表达特征

为了在茄科植物中寻找新的高赖氨酸蛋白基因，以辣椒栽培种‘江蔬7号'的成熟花粉为材料，根据马铃薯和番茄中高赖氨酸蛋白基因的保守序列设计引物，通过rt-pcr技术扩增到一条长390bp的cdna片段，继而应用race技术克隆了一个辣椒高赖氨酸蛋白基因的全长cdna，命名为cflr（genbank登录号：eu367999）。cflr基因cdna全长920bp，5＇端有84bp的非翻译区，3＇端具有完整的polya尾，包含一个编码223个氨基酸的完整开放阅读框。cflr基因与马铃薯和番茄高赖氨酸蛋白基因cdna序列的同源性为50%～60%，氨基酸序列的同源性为40%～50%。该基因所编码的蛋白质中赖氨酸含量为21.2%，苏氨酸含量为10.3%，是目前已知赖氨酸含量最高的天然蛋白。半定量rt-pcr结果表明，cflr基因在辣椒未成熟花药、成熟花粉、花瓣、茎、叶片和根中均有表达，在成熟花粉和花瓣中的表达丰度最高，在叶片中表达量明显减少，而在未成熟花药、茎和根中的表达量极少。