茶树leafy基因的克隆和表达分析

以茶树（camelliasinensis）大叶且无蕾不开花的突变体‘大叶龙’及其母株为材料，通过同源克隆结合race-pcr方法，克隆了leafy（lfy）同源基因的全长cdna序列，两种序列分别命名为cslfl1和cslfl2，其cdna全长分别为1448和1466bp，各自包含1191和1197bp的完整开放阅读框，编码396和398个氨基酸。它们与漆树科、无患子科以及壳斗目（山毛榉目）一些物种的lfy同源序列具有77%~79%的一致性，具有植物lfy成员作为转录因子的脯氨酸富集区、亮氨酸重复、酸性和碱性结构域以及保守的c–端等典型结构特征。系统发育分析表明，它们属于双子叶植物leafy分支，并且亲缘关系最近，说明两者的形成是发生在茶树物种进化过程中较晚期的复制事件。两种序列在正常开花母株及‘大叶龙’中没有区别，在母株花芽中强烈表达，在母株和‘大叶龙’叶芽中有微弱表达。这些结果说明cslfl1和cslfl2代表了茶树中lfy的同源基因，并且可能参与茶树的成花启动过程。