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园艺学报 2012
川乌头f3′5′h基因的cdna克隆与表达分析Keywords: 川乌头,类黄酮–3′,5′–羟基化酶基因,克隆,基因表达 Abstract: 利用rt-pcr结合race技术,从川乌头(aconitumcarmichaelidebx.)花朵中克隆到1个类黄酮–3′,5′–羟基化酶基因的cdna全长序列,全长1720bp,包含1个编码506个氨基酸的开放阅读框,命名为ac-f3′5′h(genbank登录号:jn635708)。序列分析表明ac-f3′5′h编码的氨基酸序列中包含有已确定的保守基序,包括cyp基序、i螺旋区和血红素结合区等。氨基酸序列比对显示ac-f3′5′h与其它物种的f3′5′h有很高的序列相似性。以川乌头18srrna基因(fj748878)为内参,通过半定量rt-pcr对ac-f3′5′h的时空表达模式进行了分析,结果显示ac-f3′5′h随花朵发育,表达量呈递增趋势,并且在正在开放的花朵中达到最高,而在根、茎、叶中不表达,推测该基因可能在调节川乌头蓝色花朵形成中发挥作用。
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