甜樱桃果实nced基因的克隆及其表达

为了进一步研究aba在甜樱桃果实成熟过程中的作用，通过rt-pcr以及race-pcr方法从甜樱桃果实克隆得到了aba合成关键酶nced基因片段pacnced1及其3′末端序列，从乙烯利处理果实中克隆得到了乙烯合成关键酶aco基因片段pacaco1。推测的pacnced1和pacaco1氨基酸序列与其它物种的nceds和acos氨基酸序列具有很高的同源性。通过半定量rt-pcr及定量rt-pcr方法分析了pacnced1和pacaco1的表达模式，发现pacnced1在甜樱桃果实发育的整个过程以及不同部位都有表达，在果肉和种子中的表达不断增加，在果实成熟之前达到最高峰，而在果柄中的表达则在果实完熟时达到最大。pacnced1在未失水的叶片和根中有微弱表达，但在失水叶片中的表达急剧上升，表现出与失水的相关性。外源aba和乙烯利能促进pacnced1在果实中的表达，而ndga和iaa对pacnced1在果实中的表达没有显著影响。在甜樱桃果实发育过程中并没有检测到pacaco1的表达信号，但是外源乙烯利和aba处理能诱导其在果实中的表达。