利用dad1反义片段转化创建菜薹可调控雄性不育材料

菜薹因为没有好的雄性不育材料或自交不亲和系，至今尚无一代杂种用于生产，根据拟南芥及白菜型油菜的花药不开裂基因dad1的保守序列设计引物，扩增菜薹的dad1基因片段（dad1f），构建反义dad1f植物表达载体，用农杆菌介导法转化菜薹，对转基因植株进行分子检测，鉴定其雄性不育性并进行育性恢复试验.克隆得到的菜薹的dad1基因片段大小为678bp，命名为brcpdad1f，其序列与拟南芥和白菜型油菜的dad1高度同源，同源率分别为88％和99％；共得到了12株转基因植株，有6株在转录水平上得到表达，表现为雄性不育，花器官畸形，花粉活力低，萌发率不到10％，且开花后不能结角果或结空角果，或者得到极少种子但种子不萌发；用对照的花粉给转基因植株授粉可使其正常结实.以500μmol·l-1茉莉酸甲酯处理可使其雄性不育得到恢复，花粉可以在柱头和培养基上萌发，具有受精能力。t1代可育株与不育株的比例都呈1:3分离,t2代不同株系的育性分离比例不同，有些株系继续呈1:3的分离，有些株系全是可育株或全是不育株，说明反义抑制呈单基因稳定遗传。