利用双t-dna载体系统获得无选择标记转基因菊花的研究

为获得具有无选择标记的转基因菊花，构建了一个双t-dna超级双元载体pcambia1301-gus，其中一个t-dna结构域中含有选择标记基因hpt，另一个t-dna结构域中含有目的基因gus，而且两个t-dna结构顺序相连，中间没有其他插入序列。利用农杆菌介导转化菊花幼嫩茎尖薄层细胞，共获得506个抗性植株，通过pcr和southern杂交检测表明共转化率为38.4%，对其中17个同时整合了hpt和gus基因的植株自交获得的t1代株系进行检测，发现约有15.8%的t1代植株中不含选择标记基因hpt，结果表明双t-dna载体系统能有效地用于培育无选择标记转基因植物。