桃成花基因pplfy的克隆与表达及多克隆抗体制备

以‘八月脆’桃成花诱导期腋芽为试材，克隆得到一个floricaula/leafy同源基因，命名为ppleafy（pplfy），genbank登录号为ef175869，该基因cdna全长1314bp，orf为1248bp，编码一个含416个氨基酸残基的蛋白，与其他物种中的leafy蛋白的同源性较高,为（74.22%~84.69%）。时期及组织特异性表达分析表明，pplfy主要在叶片、花瓣及成花诱导期及花芽形态分化初期中表达。构建了pgex-4t-1/pplfy原核表达系统，获得了可溶性融合蛋白rpplfy，分子量约为36kd。利用该蛋白免疫新西兰大白兔，获得了抗rpplfy的多克隆抗体，elisa效价为1:10000。