黄瓜贝壳杉烯氧化酶基因cko的克隆及其表达分析

以‘戴多星’黄瓜为试材，应用同源克隆和race技术从茎尖中得到赤霉素合成的关键酶——贝壳杉烯氧化酶（ko）基因cdna全长序列，命名为cko，genbank登录号为jn792591，其长度为1895bp，开放阅读框（orf）编码519个氨基酸，相对分子量为59.211kd，等电点（pi）8.45。氨基酸同源性分析发现，cko与苦瓜的ko同源性最高，达84%；序列结构分析表明，cko属于细胞色素超家族p450系，具有细胞色素p450的血红素结构域fxxgxrxcxg和跨膜结构域。实时荧光定量分析表明，cko在遮荫的徒长苗中表达量最高，是正常苗的5.18倍，在遮阴条件下喷施多效唑可降低期表达。