通过基因芯片筛选与兰考90(6)抗性相关的ESTs

普通小麦(TriticumaestivumL.)品系兰考90(6)携带一个小种专化的隐性抗白粉病新基因,暂称为PmLK906.为了深入了解小麦抗白病的分子机制,用中国春/兰考906F3纯合抗、感家系构建抗、感cDNA池,以此抗、感cDNA池为探针筛选小麦基因芯片,获得了可能与PmLK906连锁或参与了兰考90(6)抗白粉病反应的EST(expressionsequencetag)信息,其中在感病池表达量高8倍以上的有34个,抗病池表达量高8倍以上的有28个.排除假阳性结果,这些信息可能代表了与PmLK906紧密连锁或参与抗病反应的基因.从抗病池表达量高的EST中选择2个EST序列信息,设计了2对特异性引物,在抗、感亲本cDNA和抗、感cDNA池中扩增,显示出一致的差异条带,提示可能与PmLK906连锁.在兰考90(6)21-12中克隆了一个与粗山羊草(Aegilopstauschii)csAtPR5类似的基因.连锁分析表明,该基因与PmLK906连锁,遗传距离约为7.6cM.根据csAtPR5类似基因设计的一对特异性引物可作为PmLK906的STS分子标记.