快速检测软骨藻酸的间接ELISA方法

分别对抗原、一抗、二抗的最佳稀释倍数、温育温度与时间、包被条件及其显色条件进行了优化，建立了一种快速检测软骨藻酸（Domoicacid，DA）的酶联免疫分析法（ELISA）.结果表明：抗原、一抗和二抗（HRP-IgG）最佳稀释度分别为1：12800倍、1：400倍和1：3000倍；最佳包被条件为4℃包被12h；抗原抗体最佳反应温度为37℃，反应时间为60min；二抗最佳反应温度为43℃，反应时间为30min；最佳显色条件为室温不避光显色20min.该方法的样品加标回收率高达86.8%~103.2%，其最低检测限（LOD）为4.86ng·mL-1，光吸收值（OD值）的变异系数（CV）在2.46%~7.08%之间.