5′UTR序列对DR5？？GUS基因瞬时表达的影响

利用生长素响应原件(DR5)构建了DR5::GUS报告基因表达载体，并在载体构建时，对GUS的5′UTR序列进行2种设计：一种是利用载体GUS基因原有的5′UTR构建成pBI121–DR5::GUS；另一种采用植物增强表达的常用原件烟草花叶病毒(TMV)的5′端序列(Ω′)替换GUS基因原有的5′UTR序列，构建成pBI121–DR5(Ω′)::GUS。将2种载体转化根癌农杆菌后，采用烟草叶片注射浸染的瞬时表达检测法对2个载体的植物表达效果进行检测，2种载体分别转化烟草叶片2 d后，对浸染的叶盘进行GUS染色分析，pBI121–DR5::GUS的转化叶片有明显的GUS反应，而pBI121–DR5(Ω′)::GUS的转化叶片则无GUS反应。分离注射浸染部位叶盘RNA后，对GUS特异引物进行RT–PCR分析，2种转化的基因都已有效转录出RNA，但前者能翻译出相应的？–葡萄糖苷酸酶，后者则不能完成翻译过程，说明？？序列的引入并未有效提高GUS基因的表达，反而抑制了mRNA的翻译。