别藻蓝蛋白基因在毕赤酵母(Pichia pastoris)中的表达

采用亚克隆方法,将别藻蓝蛋白(allophycocyanin, APC)基因插入到毕赤酵母整合型表达载体pPIC6αA中，再用SacⅠ线性化，纯化后，用氯化锂法转化毕赤酵母菌株X-33，筛选表达APC的重组子。PCR和序列分析表明，APC基因已整合到酵母染色体中。重组子经甲醇诱导，用Western blotting在培养基上清液检测到APC，表明别藻蓝蛋白(APC)在毕赤酵母中可以表达。APC由两种亚基组成，分子量分别为19kDa和21kDa。重组子经摇瓶培养48h表达量达4.4 mg/L。