带有TAT-PTD跨膜转导域融合基因的原核表达及表达条件优化

为构建pGEX-TAT-GFP原核表达质粒并优化GST-TAT-GFP表达条件， 将PCR扩增的基因TAT-GFP克隆至质粒pGEX-2T， 转化大肠杆菌BL21， IPTG诱导表达并优化表达条件， 表达产物进行SDS-PAGE、 Western blot及荧光学特性鉴定. 结果表明： 构建的质粒经PCR、 酶切和DNA测序正确， 含有重组质粒的宿主菌经过IPTG诱导表达分子量约为54.3 kD的融合蛋白GST-TAT-GFP， 并经优化确定最佳的诱导表达条件.