植物幼小原胚的电激转化

用电激法将外源报告基因导入植物原胚获得瞬间表达.用酶解和显微解剖法分离出烟草含8~32个细胞的幼小原胚与含250~400个细胞的球形胚,导入GUS和GFP基因后置于KM8p培养基1~2d.当电场强度为500~1500V/cm时可检测到GUS蓝色反应和GFP绿色荧光其中幼小原胚在电场强度为750V/cm时外源基因瞬间表达频率最高为2.2%球形胚在电场强度为1250V/cm时表达频率最高为5.9%.若以转化细胞占胚细胞总数的比例为有效转化频率则幼小原胚的有效转化频率约为球形胚的7倍.