人蛋白激酶Bγ基因的cDNA克隆、组织表达谱分析及染色体定位

蛋白激酶B(PKB)是受第二信使调控的一类蛋白激酶,在细胞周期调控、葡萄糖吸收和促进细胞分化等生命活动中具有重要作用.由于其活性在某些人类肿瘤组织中有明显提高,且参与了Ras信号传导通路,提示其在某些肿瘤的形成过程中起介导作用.以小鼠Pkbγ基因的核苷酸序列为探针,用同源筛选方法,从人肝cDNA文库中步移获得一个长1998bp的cDNA片段,包含一段长1440bp的ORF,它编码了479个氨基酸残基.而后用“电子步移”筛选法,将该cDNA的3′端延伸至2788bp,并用PCR扩增法予以证实.该基因与已知的人PKBα,β的氨基酸序列的同源度分别高达83%和78%.表达谱分析发现该基因有两个转录本,其表达丰度基本相同,大小分别为6.5和8.5kb.该基因在人脑组织中表达量最高,在另15种组织也有不同量的表达.经过RH制图分析,发现人PKBγ基因位于染色体1q43区带的D1S304和D1S2693位标之间,这对于候选克隆已连锁定位于该区带的前列腺癌,右心室扩张性心肌病,NK细胞缺陷和甲状旁腺功能减退性身材矮小、智力低下及癫痫发作综合征等疾病基因亦将具有重要的参考价值.