多个抗病抗虫基因在水稻中的遗传和表达

将2~3个抗真菌病基因与潮霉素磷酸转移酶基因串联在一载体上,两个抗虫基因与PPT乙酰转移酶基因串联在另一载体上,利用基因枪法将它们按照1∶1的摩尔比共同导入到水稻胚性愈伤组织中.通过潮霉素抗性筛选共得到55个独立的再生植株系.其中,有70%的转基因植株含有6~7个外源基因,且位于同一载体上的几个外源基因总是共同导入到水稻植株中.Northernblot分析证明多个外源基因均能稳定表达.在分析的含有6~7个外源基因的6株转基因植株中,多个外源基因倾向于整合在基因组一个或两个遗传位点,且后代分离符合3∶1的遗传分离规律.利用潮霉素和Basta的抗性筛选实验从大量转基因植株后代中筛选得到8株同时含有2~3个抗真菌病基因和2个抗虫基因的纯合R1代转基因植株.