基因组中双重位点特异性重组体系的建立及应用

应用重组DNA技术,将FRT-FRT和LoxP-LoxP两套重组酶特异的识别位点构建在一个名为C4LFY的载体中,并依次在载体中构建了P因子、果蝇yellow基因的两个外显子和一个内含子、顺式作用元件(启动子和增强子)和侧翼区DNA,组成了双重位点特异性重组体系.通过转基因技术将该体系整合到果蝇基因组中,再分别与特异的FLP和Cre重组酶相互作用后,成功地在基因组同一位点上完成了FLP/FRT和Cre/LoxP双重的重组反应.应用这一体系,对yellow基因在发育中的表达调控进行了分子剖析.结果表明,yellow基因的组织特异性表达是受增强子直接调控的结果.还对yellow基因5′和3′侧翼区DNA进行了初步分析.