杀虫荧光假单胞工程菌的构建及其杀虫效果

以转座子mini-Tn5为介导，用高压电激转化法将BtcryIA？基因整合到生防细菌荧光假单胞菌P303-1的染色体上。通过对重组菌株染色体DNA酶切分析、PCR检测，表明转化子DNA中含有cryIA？基因及其营养期表达的强启动子。SDS-PAGE鉴定、ELISA检测及电镜观察证实了杀虫晶体蛋白在P303-1中的高效表达。生物测定结果显示工程菌对棉铃虫Helicoverpaarmigera具有显著毒杀作用。工程菌PT45、PT51、PT61、PT71和野生菌HD-73对棉铃虫2龄幼虫5天的LC50值分别为50.1281μg/g、71.7763μg/g、69.0820μg/g、57.9895μg/g、192.8747μg/g。死亡率与浓度呈正相关，体重与浓度呈负相关。