棉铃虫普通气味受体基因HarmOR9和HarmOR29的克隆和组织表达分析

【目的】对棉铃虫Helicoverpaarmigera2个普通气味受体基因的cDNA全长进行分析，明确这两个普通气味受体基因在不同组织中的表达分布，为进一步的功能研究奠定基础。【方法】利用PCR结合RACE技术克隆棉铃虫两条普通气味受体基因的cDNA全长；利用不同的生物信息学软件对序列进行结构预测、序列比对和进化树分析；利用半定量RT-PCR检测其在棉铃虫成虫不同组织中的表达。【结果】获得两条棉铃虫气味受体基因的全长序列，并命名为HarmOR9和HarmOR29（GenBank登录号分别为KJ188252和KJ188253）。序列分析显示，HarmOR9全长1206bp，编码401个氨基酸；HarmOR29全长1188bp，编码395个氨基酸。选择已报道的鳞翅目昆虫烟青虫Heliothisassulta、家蚕Bombyxmori、烟芽夜蛾Heliothisvirescens和棉铃虫的气味受体与本实验克隆得到的两个气味受体基因的编码产物进行序列比对和进化树分析，结果显示这两个气味受体与性信息素受体区别明显，并与其他普通气味受体聚类在一起。半定量RT-PCR的结果显示HarmOR9与HarmOR29都主要在触角中高表达且无雌雄间差异，HarmOR29在其他组织中均不表达；而HarmOR9在雄虫下唇须中有微量表达，在其他组织中均不表达。【结论】本研究从棉铃虫中克隆得到2个气味受体基因HarmOR9和HarmOR29的cDNA全长，其编码产物具有气味受体的典型特征并且属于普通气味受体。明确了这两个气味受体基因都在棉铃虫成虫的触角中高表达，且无雌雄差异，推测其可能参与了棉铃虫普通气味的识别过程。