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昆虫学报 2015
褐飞虱磷脂酰肌醇3激酶p85α亚基基因NlPIK3R1的克隆与功能分析, PP. 487-495 Keywords: 褐飞虱,磷脂酰肌醇3激酶,p85&alpha,NlPIK3R1基因,RNA干扰 Abstract: 【目的】PI3K信号通路在生物体中发挥重要功能,涉及糖和脂质的代谢、细胞和组织生长以及生物个体寿命等。本研究旨在探明该通路中磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)在褐飞虱Nilaparvatalugens中的功能。【方法】根据转录组提供的PI3Kp85α核心序列信息,应用cDNA末端快速克隆的技术(RACE)获得了编码PI3Kp85α的基因NlPIK3R1的全长cDNA(GenBank登录号为KP635379),并应用荧光定量PCR和通过给成虫喂食dsNlPIK3R1对NlPIK3R1进行RNA干扰(RNAi)分别对该基因的表达规律和功能进行了研究。【结果】荧光定量PCR测定结果表明,NlPIK3R1在褐飞虱若虫和雄成虫中表达量均较低,但在怀卵雌成虫中大量表达。RNAi结果表明,给褐飞虱成虫喂食0.1和0.5μg/μLdsNlPIK3R1均导致NlPIK3R1的表达明显受到抑制,高浓度组的抑制效果尤为明显。喂食dsNlPIK3R1对褐飞虱成虫具有极显著致死效果,高浓度组的褐飞虱成虫在饲喂第7天时存活率仅为37.5%,相比于空白对照组(87.00%)和dsGFP对照组(76.67%)均达到了极显著差异(P<0.01)。对NlPIK3R1的RNAi导致褐飞虱成虫羽化率下降和体重变轻。【结论】本研究结果显示,NlPIK3R1基因对褐飞虱的生存、生长和发育具有重要作用,可以作为防治褐飞虱的潜在靶标。
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