家蝇新型抗菌肽Muscin的基因克隆、表达模式及抑菌活性

【目的】鉴定家蝇Muscadomestica(Linnaeus)中一种新型抗菌肽(Muscin)基因，并分析其功能。【方法】通过数字基因表达谱和生物信息学分析，在家蝇转录组中筛选得到一条抗菌肽基因，命名为muscin。以实时荧光定量PCR技术研究该基因的组织分布以及用大肠杆菌Escherichiacoli和金黄色葡萄球菌Staphylococcusaureus混合细菌刺激后的表达量变化。并对合成肽Muscin进行抑菌活性检测及溶血率测定。【结果】muscin基因cDNA序列全长379bp，包含完整的开放阅读框153bp。推导Muscin多肽序列由50个氨基酸残基组成，N端含有由25个氨基酸残基组成的信号肽。成熟肽中富含疏水性氨基酸残基和带正电荷的氨基酸残基，理论等电点为9.39。基因定量结果显示muscin基因在血细胞和脂肪体中表达量最高。通过细菌刺激进行免疫诱导后，幼虫体内该基因的表达水平明显上调，并在6h达到高峰。抑菌和溶血实验显示c-Muscin对革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌具有广谱抑菌活性，且溶血活性较低。【结论】Muscin是一种新型的广谱抗菌肽，可能参与家蝇抗菌免疫反应，且具有一定药物开发潜质。