尺蠖蜕皮激素受体基因Eo-EcR的克隆、生物信息学分析和表达检测

【目的】蜕皮激素受体（ecdysteroidreceptor,EcR）是一种超家族核受体，它能与超气门蛋白USP组成异源二聚体复合物EcR/USP，调节20羟基蜕皮酮（20E）的生物活性，进而调控昆虫的发育、变态及繁殖等生命过程。本研究旨在克隆茶尺蠖EctropisobliquaProutEcR基因全长，并了解该基因的编码蛋白特征和时空表达模式。【方法】通过RT-PCR方法并结合RACE技术，克隆茶尺蠖EcR的基因全长，通过生物信息学软件和在线网站分析茶尺蠖EcR的生物学特性，通过实时荧光定量PCR（real-timequantitativePCR,qRT-PCR）技术比较茶尺蠖EcR在不同发育时期和6龄幼虫不同组织中的相对表达含量。【结果】克隆并鉴定了茶尺蠖EcR基因，将其命名为Eo-EcR（基因登录号:KP869130.1），Eo-EcR全长2268bp，含有1728bp开放阅读框，编码576个氨基酸。系统进化树和氨基酸同源性比对表明，Eo-EcR具有相对保守的进化特性，特别是与鳞翅目昆虫的保守性最高。三级结构模拟和功能结构域预测表明，Eo-EcR具有3个经典的结构模型，并以α螺旋为主，功能位点单一且为C4型锌指结构。qRT-PCR结果表明，Eo-EcR在5龄和6龄幼虫期以及成虫期表达量较高，在其他龄期表达量变化不大；同时在前胸腺表达量最高，在血淋巴表达量最低。【结论】明确了Eo-EcR的核苷酸序列及编码蛋白特征，明确了Eo-EcR的时空表达特性。该研究结果为进一步研究Eo-EcR的分子功能和基于Eo-EcR为靶标杀虫剂的研制奠定分子基础。