重要虫生真菌莱氏野村菌芽生孢子的形态发生

经对比，萨氏麦芽糖-酵母浸粉培养液（SMY）较适合制备莱氏野村菌Nomuraearileyi芽生孢子。以菌株Nr09接种该培养基，在130r/min、25℃全光照下震荡培养，观察芽生孢子在不同时期发育的形态变化。结果表明，分生孢子萌发产生芽管；24h萌发率为42%，36h时达84%。芽管迅速伸长形成菌丝。在48h前芽生孢子通过菌丝顶端及分枝末端缢缩的方式形成，后期则主要通过芽生孢子继续出芽的方式大量形成，78h芽生孢子数量达到最大值。芽生孢子的形成方式可为一端、两端或多端芽殖。芽生孢子的形成过程可分为5个阶段：（I）分生孢子膨大期；（II）芽管萌发期；（III）芽管延长期；（IV）芽生孢子形成初期；（V）芽生孢子指数生长期。30h后培养液中有少量草酸钙结晶出现并逐渐增多。到84h时有31%的芽生孢子细胞内液泡聚集增大，表明芽生孢子已开始进入衰老阶段。使用指数生长期制备的Nr09芽生孢子进行几丁质酶基因转化，转化效率达79个转化子/μgDNA。