毛栓菌原生质体制备和再生及单核菌株产漆酶特性

毛栓菌Trameteshirsuta能有效地降解木质素，在生物燃料、制浆和饲料工业等方面具有很高应用价值。为了获得遗传性能稳定的T.hirsuta单核菌株，研究了其菌丝生长培养基的类型、菌丝生长时间（菌龄）、酶解时间、原生质体纯化离心速度和原生质体再生培养基类型对T.hirsutaYJ-9-1原生质体制备与再生的影响；采用DAPI染色和锁状联合缺失的观察，从再生株中筛选单核菌株并考察其产酶特性。结果表明：采用YGM菌丝生长培养基、88h菌龄、1h酶解时间、4,000r/min原生质体纯化离心速度以及YGMS再生培养基，最终可获得密度大约为5.0×106个/mL的原生质体悬浮液和9.1%的再生率；从200株再生菌株中筛选出了3株单核菌株，其中一株单核菌株D-2-1的漆酶产量比原菌T.hirsutaYJ-9-1明显提高，在第12天其漆酶酶活为771.67U/L，是原菌的1.51倍。