60Co-γ对Cl.beijerinckii原生质体的辐照诱变

以产丁醇菌Cl.beijerinckii为出发菌株，将其原生质体化后进行60Co-γ辐照诱变，筛选出了一株稳定高产的变异株。原生质体的最优制备条件为：将培养至15h的细胞添加1g.L-1甘氨酸和0.3U.L-1青霉素培养2h后，37℃下，2×104U.L-1溶菌酶作用8h脱壁。经平板计数，原生质体形成率可达99.82％，原生质体再生率达10.12％。采用60Co-γ射线进行辐照诱变，当辐照剂量率5Gy.min-1，辐照剂量为500Gy时，原生质体致死率可达99.3％。经反复筛选，获得一株丁醇高产菌株R3，该菌具有较高的遗传稳定性。在P2半合成液体培养基中，37℃下静置培养72h，总溶剂产量较出发菌株提高81.46％，丁醇产量提高85.41％。