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中国科学 生命科学 2002
受NaCl诱导的盐藻果糖-1,6-二磷酸醛缩酶cDNA的克隆及其在烟草中的表达, PP. 392-398 Keywords: NaCl诱导,差异表达,叶绿体果糖-1,6-二磷酸醛缩酶,耐盐性,盐藻 Abstract: 采用快速扩增cDNA末端(RACE)技术,获得了盐藻(Dunaliellasalina)受诱导表达的果糖-1,6-二磷酸醛缩酶全长cDNA(DsALDP).蛋白质序列分析发现,DsALDP与许多植物叶绿体的果糖-1,6-二磷酸醛缩酶(AldP)具有较高的同源性(66%~73%).系统进化分析进一步证明DsALDP与藻类的AldP亲缘关系最近.就表达谱而言,DsALDP是NaCl诱导下新表达的转录本,其表达水平随诱导时间的不同而呈显著变化.筛选的DsALDPcDNA构建到双元载体pBI121并导入农杆菌用以转化烟草,对4个T1代转基因植株进行Southern检测,证明DsALDP已整合入转基因植株的基因组.RT-PCR分析显示DsALDP在这些植株中均得到有效表达.生物测试表明,T1-1,T1-2和T1-3植株在100~200mmol/LNaCl下仍保持醛缩酶活性,且其脯氨酸含量均有不同程度的升高.
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