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中国科学 生命科学 2002
黑曲霉T21glaA5′上游调控区DNA与蛋白因子的相互作用分析, PP. 122-130 Keywords: 电泳迁移率变动分析,蛋白结合因子,DNaseⅠ足印分析,黑曲霉糖化酶 Abstract: 以糖化酶生产菌株黑曲霉T21(AspergillusnigerT21)的糖化酶基因(glaA)5′cis调控区片段为探针,采用电泳迁移率变动分析(EMSA)法,从黑曲霉蛋白粗提液中检测到与glaA5′调控区特异结合的蛋白因子,并把其结合DNA定位在T21glaA5′调控区的-374~-344,-484~-414以及-580~-540bp3个区段,且此3个结合DNA的片段在EMSA实验中呈现交叉竞争,表明这3个DNA区段可与同一个蛋白因子相结合.以-374~-344bp序列为探针的紫外交联实验表明,该蛋白因子的分子量(或亚基分子量)约为10ku.利用DNaseⅠ足印分析确定了此蛋白因子在前两个区段的精细结合部位,并对其结合序列的特性进行了分析.
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