Producción de anticuerpo Monoclonal (Acmo) con Especificidad Anti B, para ser utilizado como reactivo de Hemoclasificación Production of Monoclonal antibodies with Anti B specificity used As A blood typing reagent

Resumen El objetivo de este trabajo fue producir un AcMo murino con especificidad anti B, el cual pudiera ser utilizado como reactivo de hemoclasificación. Ratones balb/c fueron inmunizados con sustancia antigénica de saliva de donante secretor, con el fin de obtener linfocitos esplénicos o esplenocitos productores de anticuerpos con especificidad anti B. Estos fueron fusionados con células de mieloma de ratón P3-X63.Ag8.653 utilizando PEG. Después de sembradas, las células híbridas o hibridomas resultantes que tuvieron la capacidad de secretar el anticuerpo requerido, fueron sometidas a clonación por dilución límite para asegurar su monoclonalidad. Posteriormente los anticuerpos fueron sometidos a evaluaciones inmunohematológicas e inmunoquímicas. Se obtuvo la clona BMS-4 secretora de anticuerpos IgM kappa, con especificidad anti B, los cuales demostraron tener una alta potencia, excelente avidez, gran sensibilidad y estabilidad en el tiempo. Dado el comportamiento demostrado por los anticuerpos en las evaluaciones realizadas, pensamos que esta clona puede ser utilizada para producir reactivo para la hemoclasificación. Abstract The purpose of this research was to produce murine monoclonal antibodies with anti B specificity to be used as reagents in red cells typing. Balb/c mice were immunized with substance B from saliva of a donor secreting B antigen, in order to obtain spleen cells or splenocytes producing antibodies with anti B specificity. These cells were fused with mouse myeloma cells P3-X63.Ag8.653 by using the PEG technique. After seeded, the hybridomas secreting the putative antibodies were cloned through the limiting dilution technique to obtain monoclonality. Afterwards, the antibodies were evaluated using immunological and immunochemical methods. BMS-4 clone secreting antibodies IgM-kappa with anti B specificity were obtained, which displayed high potency, excellent avidity, great sensibility and long time stability. We think that this clone can be used to produce a red cell typing reagent.