Purificación de la proteína de 24 KD natural (P24) del virus de inmunodeficiencia humana tipo-1 (VIH-1) utilizando inmunoafinidad

En el seguimiento de las personas infectadas con el VIH-1 resulta de gran utilidad el empleo de sistemas para detectar la presencia de proteína de 24 KD y los niveles de anticuerpos a ésta; para el desarrollo de estos sistemas es necesario contar con esta proteína purificada. El presente trabajo describe la purificación de p24 a partir de lisado viral semipurificado sobre gradiente de sacarosa, empleando cromatografía de inmunoafinidad con anticuerpos monoclonales acoplados a Sefarosa 4B activada con bromuro de cianógeno. Para la caracterización del producto purificado se utilizó electroforesis en gel de poliacrilamida con tinción de plata e inmunoelectrotransferencia. Como resultado de este trabajo se obtuvo p24 útil para ser empleada en el desarrollo de medios diagnósticos y anticuerpos monoclonales. The use of systems to detect the presence of 24kd protein as well as the levels of antibodies to it, is very useful in the follow-up of HIV-1 infected individuals. To develop these systems it is necessary to have this protein purified. The present paper describes the purification of p24 starting from the semipurified viral flattening on saccaharose gradient, using immunoaffinity chromatography with monoclonal antibodies coupled to Sepharosa 4B activaded with cyanogen bromide. For the characterization of the purified product it was used polyacrylamide gel electrophoresis with silver staining and immunoelectrotransference. As a result, it was obtained p24 which can be used for the development of diagnostic tools and monoclonal antibodies.