Separation and Determination of Uridine Diphosphoglucose (UDPGlu) and Uridine Diphosphogalactose (UDPGal) in the Cell Free Extracts of Corynebacterium glutamicium by High Performance Liquid Chromatography
高效液相色谱法分析谷氨酸棒杆菌细胞内尿苷二磷酸葡萄糖和尿苷二磷酸半乳糖

建立了利用高效液相色谱分离分析谷氨酸棒杆菌细胞内尿苷二磷酸(UDP)葡萄糖与UDP半乳糖的新方法,考察了不同色谱柱、不同分离模式及不同流动相组成对UDP葡萄糖和UDP半乳糖的保留特性及分离度的影响。结果表明,在ZorbaxNH2柱(250mm×4 6mmi d ,5μm)上以0 125mol/LKH2PO4缓冲液(pH3 6) 乙腈(体积比为40∶60)溶液为流动相,可使谷氨酸棒杆菌细胞内的两种中间代谢产物UDP葡萄糖与UDP半乳糖在22min内达到基线分离。该方法对UDP葡萄糖和UDP半乳糖的检测限分别为3 2和3 5ng。UDP葡萄糖和UDP半乳糖样品的平均回收率分别为98 26%和99 02%,相对标准偏差分别为2 71%和3 54%。