RNA干扰介导对乙型肝炎病毒复制的抑制作用

构建针对乙型肝炎病毒(HBV)核心区或表面抗原编码区的siRNA表达载体pSI-C和pSI-S，在体外HBV复制细胞模型中观察对HBV复制和表达的影响．将pSI-C，pSI-S与1.3倍HBV真核表达质粒pHBV共转染HepG2细胞，分别在转染后24，48和72h，观察pSI-C和pSI-S对细胞上清和胞内病毒抗原表达的影响，并用分子杂交方法从病毒复制、转录和翻译水平检测目的基因的表达情况．实验结果表明，pSI-C及pSI-S能明显抑制细胞内HBsAg和HBcAg的合成，呈序列特异性和剂量依赖性的特点，而对照组siRNA无抑制作用．pSI-C比pSI-S抑制作用更强，转染后第2天对HBsAg和HBeAg抑制率达高峰，分别为92％和85％．Southern和Northern杂交结果表明，HBV siRNA能降低目的基因转录和病毒复制中间体的表达水平，提示针对乙型肝炎病毒核心区和表面抗原编码区的siRNA能有效抑制HBV RNA分子转录和病毒复制，最终降低病毒抗原表达，这为运用RNAi技术进行HBV基因治疗提供了新的思路．