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海洋科学 2010
Primary culture of oyster (Crassostrea hongkongensis) gill cells
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Abstract:
采用改良的DMEM(HG)培养基, 建立了近江牡蛎(Crassostrea hongkongensis)鳃细胞体外培养技术, 包括鳃组织块培养法和胰酶消化培养法。结果表明, 组织块培养法接种6 h 后, 细胞开始从组织块中迁出, 细胞形态较小, 呈圆形、椭圆形或多边形, 直径3~6 μm。培养至3 d 时, 细胞在组织块周围形成生长晕。培养至6 d 时可进行细胞传代, 本次实验细胞已传至第6 代。胰酶消化法接种约2 h 后, 细胞逐渐贴壁, 从形态上主要分为两类, 一类为小型细胞, 形态为圆形、椭圆形或多边形, 直径3~6 μm,数量多, 增殖速度较快; 另一类为大型细胞, 形态为圆形、椭圆形或多边形, 直径10~20 μm, 部分细胞内部含有颗粒, 数量较少, 增殖速度较慢。培养至2 d 时可进行细胞传代, 传代培养物中的优势细胞皆为小型细胞。本次实验细胞已传至第6 代。