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OALib Journal期刊
ISSN: 2333-9721
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Cloning of the Phosphatidylserine Synthase Gene and its Secretive Expression in Bacillus subtilis
磷脂酰丝氨酸合成酶基因的克隆及在枯草芽孢杆菌中的表达

Keywords: Phosphatidylserine synthase,Bacillus subtilis,Heterologous expression,Enzyme coupling colorimetric method
磷脂酰丝氨酸合成酶
,枯草芽孢杆菌,异源表达,酶联比色法

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Abstract:

应用 PCR技术从 Escherichia coli K12 Sgal-(ExPASy P23830) 中扩增到大小为 1350bp编码磷脂酰丝氨酸合成酶的 DNA片段,将其插入枯草芽孢杆菌诱导型表达载体 pBES,获得重组质粒 pBES-pss后转化Bacillus subtilis DB104.经蔗糖诱导后,该磷脂酰丝氨酸合成酶在Bacillus subtilis DB104 (pBES-pss)中获得胞外分泌表达,SDS-PAGE分析发现目的蛋白分子量约为 52kDa,酶联比色法检测酶活力为 1.50U/ml,提高了磷脂酰丝氨酸合成酶的表达产量,为工业化发酵生产磷脂酰丝氨酸合成酶奠定了良好的基础.

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