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中国生物工程杂志 2008
Screening and identification of differential expressed proteins in C-serum on Latex of Tapping Panel Dryness(TPD) in Rubber Tree(Hevea brasiliensis Muell. Arg.)
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Abstract:
橡胶树死皮病(tapping panel dryness,TPD)在世界各橡胶种植园普遍发生,给橡胶种植业带来严重的危害.为了更好地了解和阐明死皮病发生、发展的分子机制.应用双向凝胶电泳技术(2-DE)比较橡胶树死皮株与健康株胶乳C-乳清蛋白质组表达的差异.采用固相pH梯度双向凝胶电泳分离橡胶树死皮株与健康株C-乳清的总蛋白质,凝胶经考染显色后,用PDQuest7.40图像分析软件进行比较分析,识别差异表达的蛋白质.这些点经过胶内酶切后进行基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MAIDI-TOF-MS)分析获取肽质指纹图谱(PMF),Mascot软件搜索SWISS-PROT 和 NCBInr数据库鉴定蛋白质.结果:(1)橡胶树死皮株与健康株C-乳清凝胶的平均蛋白质点数分别为1075±35和1134±27,其平均匹配的点数分别为982±38和1008±22,组内图像匹配率达91.89%和88.72%.(2)橡胶树死皮株与健康株C-乳清组间的平均匹配蛋白点数为970±25.利用MALDI-TOF-MS质谱技术对40个差异明显的蛋白点进行分析鉴定,通过查询数据库鉴定了27个蛋白质.建立了分辨率高且重复性较好的橡胶树死皮株与健康株胶乳C-乳清的双向凝胶电泳图谱,并应用质谱技术鉴定了其中表达差异的蛋白质点,这些差异表达的蛋白质可能参与了死皮发生和发展的过程.